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高免血清与其他抗jun消yan药同时使用，可提高免疫效果。2、补液：病犬常因脱水而死，因此补液是治聊本病的主要措施。应根据犬的脱水程度与全身状况，确定所需添加的成分和补液量，一般静脉补液量为60毫升/千克体重。可以分为静脉补液、口服补液和腹膜腔补液。3、抗jun消yan：可应用各类广谱抗生su，但不要长时间使用，以防肠道正常菌群失调，反而延缓肠道消化功能的恢复。4、止吐：呕吐严重者可肌注爱茂尔、灭吐灵(胃复安)—2毫升。5、抗休克：休克症状明显者可肌注**5—15毫克。6、加强护理：注意对病犬保暖，腹泻期间应停喂牛奶、鸡蛋、肉类等高蛋白、高脂肪性饲料，东西湖区大型的细小病菌欢迎来电，给予易消化的饲料，以碱轻胃肠负担，提高治yu率。五、给宠物主人的建议：1、应做好免疫接种。国内生产的犬细小病du病灭活疫苗都与其他疫苗联合使用。使用犬五联弱毒疫苗时，对30—90日龄的犬应注射3次，90日龄以上的犬注射2次即可，每次间隔为2—4周。以后每半年加强免疫1次。2、犬患有本病后，应及时隔离，对犬舍和饲具，用2%-4%烧碱，东西湖区大型的细小病菌欢迎来电、1%福尔马林、。武汉哪里可以治细小病菌？东西湖区大型的细小病菌欢迎来电

    本发明属于生物检测技术领域：中的兽医动物病原检测，具体涉及一种用于犬腺bingduii型、犬瘟热bingdu、犬细小bingdu和犬副流感bingdu的四重实时荧光定量pcr检测方法、检测试剂盒及其**引物和taqman探针。背景技术：：犬瘟热bingdu(caninedistempervirus，cdv)、犬细小bingdu(canineprvovirus，cpv)、犬副流感bingdu(canineparainfluenzavirus，cpiv)和犬腺bingduii型(canineadenovirusii，cav-ii)是犬bingdu性传染病暴发和流行的主要病原体。cdv染上引起的犬瘟热主要有呼吸型、消化型、神经型和混合型4种，cdv染上可引起全身性的免疫压制，病死率极高。cpv主要引起犬的急性出血性胃肠炎和幼犬急性心肌炎。cpiv染上主要引起犬的呼吸道疾病，是犬传染性呼吸系统疾病重要的病原之一。cav-ii型引起与呼吸道疾病和肠炎相关的犬接触性呼吸道疾病，但不引起肺炎症状，可引起幼犬咳嗽又叫犬窝咳。这四种bingdu单一染上或混合染上均可给养犬业带来严重的打击，四种犬病原临床症状较为相似，且常伴有混合染上，给临床诊断造成了一定的困难。文献cna建立了用于同时检测犬瘟热bingdu、犬细小bingdu、i型和ii型犬腺bingdu的多重pcr检测引物。东西湖区大型的细小病菌欢迎来电细小非常详细的治方法。

    cav2-p、cdv-p、cpv-p、cpiv-p)。具体地，cav-ii、cpv、cdv和cpiv的四重实时荧光定量pcr检测试剂盒包括以下用于25μl四重实时荧光定量pcr检测体系的试剂：模板5μl、实时荧光定量pcr反应液2×onestepu+μl(购于vazyme公司)、onestepu+μl(购于vazyme公司)、10μm-4×混合引物μl、10μm-4×混合探针μl，rna-freeh2o5μl。其中混合引物的混合方式为采用各引物的100μm原液，各取10μl混合，加无酶水补充至100μl，即每种引物的终浓度为10μm，混合探针的混合方式为采用各探针的100μm原液，各取10μl混合，加无酶水补充至100μl，即每种探针的终浓度为10μm。为方便检测，试剂盒中还可包括阳性对照和阴性对照，所述阳性对照为cav-ii、cpv、cdv和cpivbingdu基因组dna或rna，所述阴性对照为不含cav-ii、cpv、cdv和cpiv的反应体系，如h2o(双蒸水、无菌去离子水等)。使用该试剂盒对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测时，将单一包装的阳性对照品混合或直接使用混合包装的阳性对照品。为方便检测，试剂盒中还可包括标准品，其为分别携带cav-ii、cpv、cdv和cpiv的目的基因的cav-ii标准品、cpv标准品、cdv标准品和cpiv标准品(参见实施例2)，各标准品可为单独包装。

    单位g/100ml)百分比浓度或体积/体积(v/v，单位ml/100ml)百分比浓度。实施例中描述到的各种生物材料的取得途径*是提供一种实验获取的途径以达到具体公开的目的，不应成为对本发明生物材料来源的限制。事实上，所用到的生物材料的来源是广大的，任何不违反法律和道德伦理能够获取的生物材料都可以按照实施例中的提示替换使用。所用引物由上海生工有限公司合成；所用探针由上海生工基因公司合成。实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，实施例将有助于理解本发明，但不应作为对本发明内容的限制。实施例1、设计引物和taqman探针从ncbi的核酸数据库genbank(.)分别检索获得cavii型的hexon区域基因(cavii型genbank号：，列表中sedid**)的序列、cdv的h基因(cdvgenbank号：，序列表中sedidno：2)的序列、cpv型的vp2基因(cpvgenbank号：，序列表中sedidno：3)的序列、cpiv型的np基因(cpivgenbank号：，序列表中sedidno：4)的序列，用dnaman软件进行比对后，根据引物、taqman探针设计原则，在充分考虑四种bingdu保守区的差异的基础上，**终确定：cavii的检测序列为ii型cavhexon基因5’端第1765-1960位碱基，序列表中sedidno：5所示。汉阳哪有好的动物医院？

    在实施例1中的引物和探针的引导下进行四重实时荧光定量pcr检测，25μl实时荧光定量pcr的检测体系包括：模板5μl、实时荧光定量pcr反应液2×onestepu+μl(购于vazyme公司)、onestepu+μl(购于vazyme公司)、10μm-4×混合引物μl、10μm-4×混合探针μl，rna-freeh2o5μl。实时荧光定量pcr反应条件可为：反转录52℃15min；95℃2min；pcr扩增条件：95℃15s，56℃30s，45个循环。在每个循环的退火结束时进行荧光信号检测。2)用得到的ct值或荧光信号的变化实现对cav-ii、cpv、cdv和cpiv定性检测，不同荧光通道出现标准的“s”型扩增曲线，表明待测样品中含有cav-ii、cpv、cdv和cpivbingdu，再根据荧光信号的强度和步骤，得出待测样品中所含有cav-ii、cpv、cdv和cpivbingdu的拷贝数，实现定量检测。3)具体判定方法：①若待测样品在hex通道中的扩增曲线为标准的s型曲线，且ct值≤32，则结果判定为cpivbingdu核酸阳性；②若待测样品在fam通道中的扩增曲线为标准的s型曲线，且ct值≤32，则结果判定为cpvbingdu核酸阳性；③若待测样品在cy5通道中的扩增曲线均为标准的s型曲线，且ct值≤32，则结果判定为cdvbingdu核酸阳性。武汉治细小病菌哪里好？东西湖区大型的细小病菌欢迎来电

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