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标准品浓度分别为1×108、1×107、1×106、1×105、1×104、1×103copies/μl。检测结束后，以各标准品的浓度log值(x轴)对其相应ct值(y轴)作图，东西湖区好的细小病菌地址，绘制标准曲线，标准曲线如图3所示，其中cav2相关系数为r2＝，误差较小，标准曲线可用，由标准曲线得到的线性方程为：y＝，cdv相关系数为r2＝，误差较小，标准曲线可用，由标准曲线得到的线性方程为：y＝，cpv相关系数为r2＝，误差较小，标准曲线可用，由标准曲线得到的线性方程为：y＝，cpiv相关系数为r2＝，误差较小，标准曲线可用，由标准曲线得到的线性方程为：y＝。因此标准曲线可用于对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测，东西湖区好的细小病菌地址。、对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测用本发明的四重实时荧光定量pcr检测方法对从金宇保灵生物药品有限公司疫苗研究室收集的10份犬源病料(待测样品)提取的dna或rna(检测样)进行检测，以灭活的cav-ii、cpv、cdv和cpiv细胞培养物提取的dna或rna为阳性对照样，以无酶水为阴性对照样，根据实时荧光定量pcr检测结果，东西湖区好的细小病菌地址，对样本中cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行定性判定，并对bingdu的拷贝数进行定量。具体检测方法包括以下步骤：1)以从待测样品中提取的基因组dna或rna为模板。 武汉江夏的宠物医院。东西湖区好的细小病菌地址
3’端标记有bhq2荧光淬灭基团；上述taqman探针(cpiv-p)的5’端标记有hex荧光报告基团，3’端标记有bhq2荧光淬灭基团。本发明的另一方面提供一种用于对犬腺bingduii型、犬细小bingdu、犬瘟热bingdu和犬副流感bingdu进行四重实时荧光定量pcr检测及鉴别的试剂盒，包括上述的引物和taqman探针组；使用上述试剂盒时的25μl实时荧光定量pcr检测体系中所述引物和taqman探针的用量推荐为：10μm的4×混合引物μl，10μm的4×混合探针μl，其中所述4×混合引物为cav2-f、cav2-r、cdv-f、cdv-r、cpv-f、cpv-r、cpiv-f、cpiv-r的等浓度混合，推荐地，其中各引物的浓度为10μm，所述4×混合探针为cav2-p、cdv-p、cpv-p、cpiv-p的等浓度混合，推荐地，其中各探针的浓度为10μm。上述试剂盒中还包括阳性对照品和阴性对照品，阳性对照品为犬腺bingduii型、犬细小bingdu、犬瘟热bingdu和犬副流感bingdu的基因组dna或rna，各阳性对照品为单一包装或混合包装，阴性对照品为不含犬腺bingduii型、犬细小bingdu、犬瘟热bingdu和犬副流感bingdu的反应体系，如h2o(双蒸水、无菌去离子水等)。东西湖区好的细小病菌地址武汉动物医院哪家好？
也可等浓度混合包装；使用该试剂盒对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测时，将单一包装的标准品等浓度混合或直接使用混合包装的标准品。为方便检测，试剂盒中还可包括实施例2获得的标准曲线和说明书，该说明书内容包括pcr反应程序：实时荧光定量pcr反应条件为：反转录52℃15min；95℃2min；pcr扩增条件：95℃15s，56℃30s，45个循环。实施例5、疫苗生产过程中对疫苗半成品中抗原的实时荧光定量pcr检测使用实施例4的试剂盒对金宇保灵生物药品有限公司疫苗研究室提供的12份疫苗生产中半成品样品中抗原及其含量进行检测，检测方法与实施例2中步骤，待测样品编号为s1-s12，检测结果如下表5所示，可见本发明提供的对cav-ii、cpv、cdv和cpiv进行四重实时荧光定量pcr检测的试剂盒能够实现对疫苗生产中半成品样品中抗原的定性检测及其含量的定量检测，可为疫苗生产过程中质量监控和合理化配苗(如评估配制疫苗抗原的准确含量，为疫苗抗原含量提供数据基础)提供有力依据，确保疫苗接种的安全性和合理性。表5：12份疫苗生产中半成品样品的四重实时荧光定量pcr检测结果根据上表5的定量检测结果，拷贝数达到105的半成品样品可进行成品苗的配制。
平时应做好免疫接种。国产犬六联苗临床发现免疫保护力低，建议注射进口犬二联疫苗，幼犬45天以上健康状态下即可注射，根据品牌的不同，分别需要注射一针或者两针。二联疫苗为犬细小与犬瘟热疫苗，这是犬类基础的疫苗，无论如何都很重要，价格也不高，所以请广大的狗主人注射。注射疫苗后7-15日为免疫期，因为二联疫苗是弱毒苗型疫苗，所以在这个时间内，狗狗的是极弱的，不要给狗狗洗澡，不要外出，尽量通风，保持狗狗居住环境的卫生。这是重要的。汉口有哪些好的宠物医院？
末了通过标准曲线对未知模板进行定量分析(heidca，stevensj，livakkj，；6(10)：986-94.)。实时荧光定量pcr技术是一种对bingdu基因组进行检测的相对定量技术，与普通pcr技术相比，增加了一个两端带有荧光标记的寡核苷酸探针，具有灵敏度高、特异性强、重复性好、定量准确的优点，可以利用多种荧光基团实现多种基因的检测，并可利用中间的寡核苷酸探针实现相似性较高基因的鉴别。本发明基于以上基本原理针对四种bingdu设计了四对特异性引物和四条寡核苷酸探针，利用碱基互补配对的原理，建立了一种特异性检测cav-ii、cpv、cdv和cpiv的四重实时荧光定量pcr检测方法，并基于设计得到的特异性引物和探针提供一种能同时检测和鉴别cav-ii、cpv、cdv和cpiv的四重实时荧光定量pcr检测试剂盒。通过以下具体实施方式详细说明本发明。下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法，具体步骤可参见：《分子克隆实验指南》(《molecμlarcloning:alaboratorymanual》sambrook，j.，russell，davidw.，molecμlarcloning:alaboratorymanual，3rdedition，2001，ny，coldspringharbor)。所述百分比浓度如无特别说明均为质量/质量(w/w，单位g/100g)百分比浓度、质量/体积(w/v。武汉附近的动物医院。武昌区好的细小病菌价格
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90日龄以上的犬免疫两次，每次间隔为2-4周，每次注射1毫升。2，当犬群暴发本病后，应及时隔离，对哈士奇的狗窝和饲具，用2-4%烧碱、1%福尔马林、(32倍稀释)反复消毒。对无治yu可能的犬，应尽早扑杀，焚烧深埋。第三，对轻症病例，应采取对症疗法和支持疗法。对于肠炎型病例，因脱水失盐过多，及时适量补液显得十分重要。为了防止继发染上，应按时注射抗生su。也可应用抗犬细小病du高免血清进行治聊，其用量为：每犬皮下或肌肉注射5-10毫升，每日或隔日注射1次，连续2-3次。三、防治“犬细小病du”的中药疗法(偏方)：“白乌汤”方剂：白头翁15克，乌梅15克、黄连5克、黄柏5克、郁金10克，诃子10克。用法：加水1000克，煎数沸，取汤汁候温灌服，每日一剂。如病犬呕吐过于剧烈，可在灌服前2小时左右先注射胃复安注射液;如病犬脱水严重，应辅以输液治聊。好了，哈士奇翻肠子的原因介绍到这里，你觉得怎么样?如果有兴趣，你可以看看有关哈士奇喂养和疾病的知识，比如哈士奇幼犬的喂养，以及哈士奇的常见疾病。东西湖区好的细小病菌地址
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